骨髓间充质干细胞诱导分化为肝细胞的方法及机制研究与进展

中国组织工程研究第２Ｏ誊第５０勇　２０１６—１２—０２出版　一ｃ尺　．。　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｔｉｓｓｕｅ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｄｅｃｅｍｂｅｒ　Ｚ　２０１６　Ｖｏ１．２０，Ｎｏ．５０　・综述・　骨髓间充质干细胞诱导分化为肝细胞的方法及机制研究与进展　谢树才，张剑权，蒋锡丽，周奄　帅（中南大学湘雅医学院附属海口医院（海口市人民医院），海南省海口市５７０２０８）　谢树才．张　权　蒋锡丽。竭烟．鸯髓阃充质干细胞诱导分化为秆细瞻的方法及机翩砑究与进曩　中国组织Ｉ程研　ＯＲＣＩＤ：００００－０００２－０５１３－４０９７（张剑权）　究，２０１６．２０《５０）：７５８６—７５９３．　ＤＯｈ　１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．２０９５—４３４４．２０１６．５０．０２０　文章快速阅读：　骨髓间充质干细胞分化为肝细胞的诱导方法及机制　诱导方法：　添加特定的细胞因子、　运用损伤肝组织或血　清、提供特殊的细胞外　微环境、细胞基因修　饰、中药诱导及其他诱　导方法　谢树才，男，１９９０年生，　湖南省衡阳市人，汉族，　在读硕士，主要从事骨髓　化的相关研究　结论：　骨髓间充质干细胞定　向诱导分化的肝细胞　问充质干细胞增殖及分　检索：　在中国知网、维普、万方和　ＰｕｂＭｅｄ进行文献检索，检索　词为“肝细胞（肝样细胞），骨髓　间充质干细胞，诱导分化”和　通讯作者：张剑权，博士，　可提供理想的细胞来　源，为肝细胞移植和人　工肝运用于临床治疗　主任医师，中南大学湘雅　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ（一ｌｉｋｅ）ｃｅｌｌｓ，ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　医学院附属海口医院（海　ｃｅｌｌｓ，ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ’　’主要机制：　Ｎｏｔｃｈ信号通路、　Ｗｎｔ／￣一ｃａｔｅｎｉｎ信号　通路、Ｐ３８信号通路、　ｍｉＲ－１２２及钙离子的　影响　终末期肝病提供了新　的策略　口市人民医院），海南省　海口市５７０２０８　中图分类号：Ｒ３１８　文献标识码：Ａ　文章编号：２０９５－４３４４　文题释义：　（２０１　６）５Ｏ・０７５８６—０８　稿件接受：２０１６－１０．０８　Ｎｏｔｃｈ信号通路：Ｎｏｔｃｈ基因编码一类高度保守的细胞表面受体，它们调节从海胆到人等多种生物细胞　的发育。Ｎｏｔｃｈ信号影响细胞正常形态发生的多个过程，包括多能祖细胞的分化、细胞凋亡、细胞增殖　及细胞边界的形成。Ｎｏｔｃｈ基因位点突变引起的表型改变，表明Ｎｏｔｃｈ信号作用的多样性。　ｍｉＲ－１２２：是一种专一表达于肝脏的ｍｉＲＮＡ，在生理状态下参与肝细胞发育、肝细胞表型、分化代谢，　以及肝细胞应急应答等基本生命活动过程。在病理状态下，ｍｉＲ．１２２有促进ＨＣＶ复制和翻译的作用，　还可促进肿瘤细胞的凋亡，在肝细胞癌发生、发展过程中发挥抑癌基因样作用。　摘要　背景：已有多项研究证明骨髓间充质干细胞可以跨胚层分化为肝细胞，其向肝细胞定向诱导分化的方案　很多，但其具体的分子机制目前尚不清楚。　目的：综述骨髓间充质干细胞诱导分化为肝细胞的方案及分化机制。　方法：检索ＣＮＫＩ数据库、维普、万方和ＰｕｂＭｅｄ数据库２００４至２０１５年期间关于骨髓间充质干细胞　向肝细胞分化的文章。检索词分别为“肝细胞（肝样细胞），骨髓间充质干细胞，诱导分化”和　“ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ（一ｌｉｋｅ）ｃｅｌｌｓ，ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ，ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ”。最后选择６２篇文　章纳入结果分析。　结果与结论：骨髓间充质干细胞诱导分化为肝细胞的方案很多，但其具体的分化机制仍不甚清楚，目前　国内外研究较多的主要有Ｎｏｔｃｈ信号通路、ＷｎＵｐ．ｃａｔｅｎｉｎ信号通路、Ｐ３８信号通路、ｍｉＲ．１２２及钙离　子的影响等；骨髓间充质干细胞定向分化的成熟肝细胞为肝细胞移植和人工肝提供了理想的细胞来源，　从而使肝细胞移植和人工肝运用于临床治疗终末期肝病提供了新的策略。　关键词：　于细跑：分化；骨髓阃充质于细跑：诱导分化：盱镪魄：分化机铂　主题词：　骨髓：闻质于细跑：细瞻分囊二：　基金资助：　缅咆　组织Ｉ程　海赢各科技资助项目（ＺＤＸＭ２０１５０８￣　７５８６　Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ　１０００２，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１０１８０　ｗｗｗ．ＣＲＴＥＲ．ｏｒｇ　谢树才　等。骨髓阃充硬干细瞻诱导分化为　缅魄的力法及机镑ｑ磅究ｓ进展　ｗｗ　ＣＲＴＥＲ．ｏｒｇ　Ｘｉｅ　Ｓｈｕ—ｃａｉ，Ｓｔｕｄｙｉｎｇ　ｆｏｒ　ｍａｓｔｅｒ’ｓ　ｄｅｇｒｅｅ，Ａｆｉｌｆｉａｔｅｄ　Ｈａｉｋｏｕ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　ＣｅｎｔｒａＩ　Ｓｏｕｔｈ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｘｉａｎｇｙａ　ＳｃｈｏｏＩ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｇ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　’　Ｘｉｅ　Ｓｈｕ—ｃａｉ，Ｚｈａｎｇ　Ｊｉａｎ—ｑｕａｎ，Ｊｉａｎｇ　Ｘｉ—ｌｉ，Ｚｈｏｕ　Ｓｈｕａｉ（Ａｆｉｌｆｉａｔｅｄ　Ｈａｉｋｏｕ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｓｏｕｔｈ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｘｉａｎｇｙａ　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ（Ｈａｉｋｏｕ　Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａ１），Ｈａｉｋｏｕ　５７０２０８，Ｈａｉｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ　ＢＡＣＫＧＲＯＵＮＤ：Ａ　ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｈａｖｅ　ｓｈｏｗｎ　ｔｈａｔ　ｔｈｅｒｅ　ａｒｅ　ｍａｎｙ　ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｂｙ　ｗｈｉｃｈ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｃａｎ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ，ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｉｃ　ｍｏｌｆｅｃｕｌａｒ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　（Ｈａｉｋｏｕ　Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａ１）　Ｈａｉｋｏｕ　５７０２０８，Ｈａｉｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ　Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ：　Ｚｈａｎｇ　Ｊｉａｎ－ｑｕａｎ，Ｍ．Ｄ．，　Ｃｈｉｅｆ　ｐｈｙｓｉｃｉａｎ，Ａｆｉｌｆｉａｔｅｄ　ｉｓ　ｕｎｃｌｅａｒ　ｙｅｔ．　ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ：Ｔｏ　ｒｅｖｉｅｗ　ｔｈｅ　ｐｒｏｇｒａｍｓ　ａｎｄ　ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｂｙ　ｗｈｉｃｈ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ．　Ｈａｊｋｏｕ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｃｅｎｔｒａｌ　ＳｏＵｔｈ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｘｉａｎｇｙａ　ＭＥＴＨＯＤＳ：Ａ　ｃｏｍｐｕｔｅｒ－ｂａｓｅｄ　ｏｎｌｉｎｅ　ｓｅａｒｃｈ　ｏｆ　ＣＮＫＩ。ＶｌＰ，ＷａｎＦａｎｇ　ａｎｄ　ＰｕｂＭｅｄ　ｄａｔａｂａｓｅｓ　ｗａｓ　ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ　ｔｏ　ｒｅｔｒｉｅｖｅ　ａｒｔｉｃｌｅｓ　ａｂｏｕｔ　ｄｉｒｅｃｔｉｏｎａｌ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｔｏ　Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　（Ｈａｉｋｏｕ　Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａ１）　Ｈａｉｋｏｕ　５７０２０８，Ｈａｉｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ．Ｃｈｉｎａ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ　ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　ｂｅｔｗｅｅｎ　２００４　ａｎｄ　２０１　５．Ｔｈｅ　ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　ｗｅｒｅ“ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ（－ｌｉｋｅ）ｃｅｌｌｓ，ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ，ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ”ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ａｎｄ　Ｅｎｇｌｉｓｈ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｆｉｎａｌｌｙ，６２　ａｒｔｉｃｌｅｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｃｌｕｄｅｄ　ｉｎ　ｒｅｓ　ｕ　ｌｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ．　ＲＥＳＵＬＴＳ　ＡＮＤ　ＣＯ￣ＩＣＬＵＳｉＯＮ：Ｔｈｅｒｅ　ａｒｅ　ｍａｎｙ　ｐｒｏｇｒａｍｓ　ｆｏｒ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆｂ　ｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ＇￣ｅｌｌｓ，ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｓｐｅｃｉｉｆｃ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｍｅｃｌ￣ａｎｉｓｍ　ｉｓ　，ｓｔｉｌｌ　ｕｎｃｌｅａｒ．Ｍａｎｙ　Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｍａｉｎｌｙ　ｆｏｃｕｓ　ｏｎ　Ｎｏｔｃｈ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ，Ｗｎｔ／＠－ｃａｔｅｎｉｎ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｐａｔｈｗａｙ，Ｐ３８　ｓｉｇｎａｌ　ｐａｔｈｗａｙ，ｍｉＲ－　２　ａｎｄ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｃａｌｃｉｕｍ　ｉｏｎｓ．Ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａＩ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｔｈａｔ　ｃａｎ　ｂｅ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｔｏ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ　ｉｎｔｏ　ｍａｔｕｒｅ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ　ｐｒｏｖｉｄ　ａｎ　ｉｄｅａｌ　ｃｅｌｌｕｌａｒ　ｓｏｕｒｃｅ　ｆｏｒ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｒｔｉｆｉｃｉａｌ　ｌｉｖｅｒ．ｗｈｉＣ　ｈ　ｉｓ　ｐｒｏｐｏｓｅｄ　ｔｏ　ｂｅ　ａ　ｎ鲫ｓｔｒａｔｅｇｙ　ｆｏｒ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｆ　ｅｎｄ．ｓｔａｇｅ　ｌｉｖｅｒ　ｄｉｓｅａｓｅ．　Ｓｕｂｊｅｃｔ　ｈｅａｄｉｎｇｓ：Ｂｏｎｅ　Ｍａｒｒｏｗ；Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　Ｓｔｅｍ　Ｃｅｌｌｓ；Ｃｅｌｌ　Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ；ｌＨｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ；Ｔｉｓｓｕｅ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｆｕｎｄｉｎｇ：ｔｈｅ　Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｆｕｎｄ　ｏｆ　Ｈａｉｎａｎ　Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｎｏ．ＺＤＸＭ２０１　５０８２　Ｃｉｔｅ　ｔｈｉｓ　ａｒｔｉｃｌｅ：Ｘ／ｅ　ＳＣ，Ｚｈａｎｇ　ＪＱ，Ｊｉａｎｇ　ＸＬ，Ｚｈｏｕ　Ｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｇ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ　Ｚｕｚｈｉ　Ｇｏｎｇｃｈｅｎｇ　Ｙａｎｊｉｕ．　２０１６；２０（５０）：７５８６－７５９３．　０引言ｌｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．　终末期肝病（ｅｎｄ　ｓｔａｇｅ　ｌｉｖｅｒ　ｄｉｓｅａｓｅ，ＥＳＬＤ）　遗传背景稳定等众多优点逐渐成为众多干细胞中最　受科研工作者关注的细胞之一【引。骨髓间充质干细胞　诱导分化为肝细胞已经取得了显著的研究成果，现就　骨髓间充质干细胞的分离培养、诱导分化为肝细胞的　方案及分化机制进行综述。　是由肝炎、肝硬化、肝癌、药物性肝损伤、自身免　疫性肝病等导致肝功能极度减退甚至衰竭的一种病　理状态，预后极差。终末期肝病目前最理想的治疗　方法为肝移植，但由于供者缺乏和免疫排斥反应等　因素限制了其在临床上的应用…。近年来，肝细胞移　１　资料和方法Ｄａｔａ　ａｎｄ　ｍｅｔｈｏｄｓ　、　植和人工肝被认为是肝移植替代或辅助疗法，促进损　伤肝脏的再生【　，给临床上终末期肝病的治疗带来了　曙光，然而都面临着细胞来源严重缺乏的问题。干细　胞诱导分化为成熟的肝细胞可以为肝脏疾病的细胞　１．１文献检索和筛选要求　１．１．１　检索数据库　ＣＮＫＩ数据库、维普、万方和　ＰｕｂＭｅｄ数据库。　１．１．２检索途径、检索词及各检索词的逻辑关系　以主题词和关键词检索途径检索。　检索　中文检索词为“肝细胞或肝样细胞，骨　髓间充质干细胞，诱导分化”；英文检索词为　“ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　（．１ｉｋｅ）　ｃｅｌｌｓ，　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ，ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ”。　移植治疗和人工肝提供了理想的细胞来源【　目前研　究干细胞的种类较多，包括胚胎干细胞　造血干细胞、　间充质干细胞、卵圆细胞、小肝细胞样祖钿胞、边群　细胞、　骨髓源肝干细胞和外周血干细胞等等，骨髓间　充质干细胞（ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ，　ＢＭＳＣｓ）由Ｆｒｉｅｄｅｎｓｔｅｉｎ等［４】最先在骨髓中发现，因取　检索词的逻辑组配　骨髓阃充质　细盹ＡＮＤ　细胞ＯＲ肝样细胞）ＡＮＤ（ＯＲ）诱导分化。　检索的时阃范围　２００１至２０１　５年　７５８７　材方便、易分离纯化、易培养扩增、易诱导分化、免　疫原性低、安全性高、多向分化潜能、无伦理问题、　ＩＳＳＮ　２０９５—４３４４　ＣＮ　２１－１５８１　Ｒ　ＣＯＤＥＮ：ｚＬＫＨＡＨ　列０　骨髓　毫矮ｌ‘　融诱　分化　扑组匏娲西法硬☆ｌ　允｜，进　…。一。　表１　各种分离方法的原理及优缺点　原理　优点　胞纯度／ｆ　够－　，细胞均。　芹　。｝］　１１　髓Ｉ＇ｌｌＪ充质１。　胞贴　，ｌ－．长的特　ｒ１　刘Ｊ　进｝Ｊ　操作两便、不易污染，所　个坩肯逝　ｌ　分离法　利ｊ　，ｊ－　Ｉ　Ｊ　Ｉ　筛选，通过濉和ｆｉ＜Ｊ￣ＪＬ械分离（换液和化代）【！ｌＪ　Ｉ　ｊ’除上　细胞增炳较快，怂浮　Ｋ的造　系细胞和填他杂细胞　获得夫　ｉ　ｊ肛　川　细胞０性较高　髓Ｍ允质｛‘细胞　ｊ　他细胞的密度簪肄，　瞥Ｊｌ｛＝梯』ｃ｛＝分离法　ｒ　试剂川’能损伤细胞、　低细胞的ｑ－存｝　　一Ｐｅｒｃｏ１分离液能将骨髓『Ｈ】充质ｆ　细胞确Ｉ红细胞、　ｒ１．ｌｆｉｔｊ地等ｌｔ他细胞分离开，取仃核细胞贴＾钱蚺捧　　仃｝　离的０“　嫂磁殊；』、分选法　通过　髓　允Ｊ贞１’细胞表　带仃或缺夫的机　成　细胞ｊ，导敛其增吼硬彩　分化能力会受到　影响　分离成本较ｒ西、操作　朵、刈细胞的活　ｆ　选或负选，从伽扶搿棚对纯化的中¨ｌ｛｛迁！　允　硐Ｉ流　细胞术分离　分进行Ｉ１｜、　影响也较人，扩增迷艘　、操作过　易污染　分选后的骨髓　Ｉ充质＿ｒ　胞　易贴　，｛　长和　分化　Ｊ蓖　胞　图１　荧光倒置显微镜下人骨髓间充　质干细胞形态（×１　００）　汪：［划　ｌ＿Ａ为　４代人　ｉ　｝髓　允质　细胞；Ｂ为　５代人坩ｆ｛迁！　允质ｒ‘　细胞：Ｃ为诱　人竹髓ｎ』Ｊ允质ｆ‘细胞　粥２１人形态变化。（　｝　Ｊ：　片均来　源卜作１彳的　题　）。　１．２文献筛选流程和筛选标准　行优化　即在１．５　ｈ收集未贴壁的细胞悬液重新接　１＿２．１　丈献的筛选标准　①原创及论点论据可靠的　文章；②有关骨髓间充质干细胞分离培养及鉴定的文　种，接种后１２，２４　ｈ早期各换液１次，此法主要是利　用细胞贴壁性能的差异，可以提高细胞的纯化率和减　少混杂细胞的影响。　章：③有关骨髓间充质干细胞向肝（样）细胞分化及其　机制研究的文章；④相似或相同内容优先选择近期发　表或权成期刊发表的文章。　目前为止，尚未发现骨髓间充质干细胞特异的　表面标志　Ｊ，一般采取阴性选择和阳性选择相结合　１Ｉ２．２排除的丈献①重复或类似的同一研究；②骨　的方式进行分离和鉴定。它不表达造血干细胞的表　面标志［９－１０］，包括ＣＤ３４、ＣＤ４５、ＣＤ１４、ＣＤ３、ＣＤ４、　髓间充质干细胞增殖及其机制探讨的丈章：③骨髓间　充质干细胞分化为其他种类细胞及其机制探讨的文　章　ＣＤ８、ＣＤ１１等，不表达共刺激分子ＣＤ４０、ＣＤ８０、　ＣＤ８６，不表达与人类白细胞抗原（ＨＬＡ）识别有关的共　共检索到有关文献３３６篇，其中英　刺激分子Ｂ７＿１、Ｂ７—２Ａ．主要组织相容性复合物（ＭＨＣ）　ＩＩ类分子，也不表达ＣＤ３１、ＣＤ１８、ＣＤ５６，低水平　１＿２－３质量评估丈９０篇，中文２４６篇。通过对文章标题和摘要的阅读　进行初步筛选，剔除与研究目的不符和重复论点论据　的丈章：然后阅读全文，判断与纳入标准一致的文章，　最后选择６２篇符合标；住的丈献进行结果分析。　表达ＣＤ４４、ＣＤＷ９０、ＣＤ１　１　ｂ、ＣＤ５４、ＣＤ１　０６（＿ｔ￣－管　细胞黏附分子），表达人白细胞抗原Ｉ类分子（ＨＬＡ　Ｉ）、Ｓｔｒｏ一１，高表达ＣＤ２９、ＣＤ４４、ＣＤ４９ｅ、　ＣＤ７３（ＳＨ３／４）、ＣＤ１０５（ＳＨ２）、ＣＤ１３、ＣＤ４８、ＣＤ７１、　２结果Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＣＤ５６、ＣＤ９０、ＣＤ１　６６　，　２．１　骨髓间充质干细胞的分离培养及鉴定　骨髓间充　质干细胞常用的分离方法主要有全骨髓贴壁分离法、　密度梯度离心法、流式细胞仪分离法和免疫磁珠分离　法４种　Ｊ，４种方法的原理、优缺点见表１。荧光倒置　２．２肝（样）细胞的鉴定　２＿２＿１　细胞的形态　正常肝细胞光镜下为多边形或　类圆形，呈典型上皮样细胞形态，并可融合成单层片　状细胞，而未经诱导分化的骨髓间充质干细胞多表现　为成纤维细胞样长条形或内皮细胞样梭形，贴壁较　紧，在体外诱导后细胞形态逐渐由梭形或长条形转变　为不规则圆形或类圆形，在透视电镜和扫描电镜下骨　户０　Ｂｏｘ　１０００２．Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１０１８０　ＷＷＷ，Ｃ尺７＿Ｅ尺ｏｒｇ　显微镜下人骨髓间充质干细胞形态见图１。目前国内　外大多采用的是全骨髓贴壁分离法联合密度梯度离　心法。近来也有学者提出在全骨髓贴壁法的基础上进　７５８８　谢树才．等．骨髓间充质干细咆诱导分化为盱细跑的方法及机毒ｄ研究与进襞　～ｃ一。　髓间充质干细胞具有幼稚细胞的结构特点，而肝样细　胞的胞内细胞器明显增多，具有上皮样细胞的极性结　构特点【１１】。　２－２．２　细胞功能和细胞标志物　白蛋白、甲胎蛋白、　发现肝细胞生长因子联合表皮生长因子比单用肝细　胞生长因子和表皮生长因子时更能诱导骨髓问充质　干细胞向肝细胞分化。　２．３．２运用损伤肝组织或血清损伤的肝组织或血　细胞角蛋白、糖原及尿素均为肝系细胞的特异性标　志物。甲胎蛋白、细胞角蛋白１９为不成熟肝细胞标　清可以分泌促进干细胞分化的生长因子，如肝细胞生　长因子、白细胞介素２、转化生长因子Ｂ１，被认为是　骨髓间充质干细胞向肝细胞诱导分化的良好条件。　Ｓａｕｌｎｉｅｒ等【２’】用射频消融损伤的肝脏血清成功将间充　质干细胞诱导分化为肝细胞；范莎莎等【２　】发现肝纤维　志物，随着肝细胞的成熟少量表达甚至不表达，白　蛋白和细胞角蛋白１８是成熟肝细胞的标志【１２】。检测　白蛋白、甲胎蛋白、细胞角蛋白的存在可以支持骨髓　间充质干细胞向肝系细胞的分化。肝脏是糖原合成与　储存的主要场所，也是氨转化为尿素的惟一场所；因　此检测胞内糖原的存在和尿素合成也能证明骨髓间　充质干细胞成功诱导分化为肝细胞。成熟的肝细胞还　表达一些酶类，如药物代谢酶细胞色素　Ｐ４５０（ＣＹＰ４５０）、糖类代谢酶如６一磷酸葡萄糖磷酸酶　（Ｇ６Ｐ），还有氨基酸代谢的主要酶类，包括酪氨酸转　氨酶（　）、丙氨酸转氨酶（ＡＡＴ）、色氨酸２，３一双加　氧酶（ＴＤＯ）【１引。　２．３　用的诱导方案　２．３．１　添加特定的细胞因子在胚胎干细胞分化成　熟肝细胞的发育过程中，体内多种细胞因子（如肝细　胞生长因子、成纤维生长因子、表皮生长因子、胰岛　素样生长因子１、转化生长因子ａ等）参与了肝细胞的　分化成熟，调控着肝细胞发育的各个阶段，在培养基　中加入上述因子，就能促进骨髓间充质干细胞向肝细　胞的分化成熟。Ｗａｎｇ等【１　Ｊ用肝细胞生长因子将大鼠　骨髓间充质干细胞成功诱导分化为肝细胞样细胞；　Ｉｓｈｉｋａｗａ　】观察到成纤维生长因子２能促进小鼠骨　髓间充质干细胞向肝系细胞分化并提高白蛋白的分　泌；胡晶、王佐周等　协’　发现２０　ｐｇ／Ｌ成纤维生长因　子２比１０　ｐｇ／Ｌ成纤维生长因子２更能诱导骨髓问充质　干细胞表达白蛋白、细胞角蛋白１９和合成糖原，进一　步研究显示２０　ｐｇ／Ｌ成纤维生长因子２比同样浓度的　肝细胞生长因子具有更强的诱导骨髓间充质干细胞　向肝细胞分化的能力。也有研究者发现联合添加上述　因子其诱导效果可能更好。Ａｙａｔｏｌｌａｈｉ　】用肝细胞　生长因子联合胰岛素样生长因子在体外将间充质干　细胞诱导分化为肝样细胞，并检测出此肝样细胞拥有　分泌白蛋白、尿素和储存糖原的功能。Ｓｕｎ　在培　养基中加入肝细胞生长因子和成纤维生长因子４成功　将骨髓间充质干细胞诱导成肝细胞样细胞，并表达甲　胎蛋白、细胞角蛋白１８、白蛋白；国内学者曹亮等　ｏ】　ｌｓＳＮ　２０９５－４３４４　ｃＮ　２１．１５８１，Ｒ　ｃｏＤＥＮ：ｚＬＫＨＡＨ　化大鼠血清中转化生长因子Ｂ１增加促使骨髓间充质干　细胞向肝细胞定向分化。Ａｖｉｔａｌ　ｚ３】采用含瘀胆血清的　培养液成功诱导出肝细胞表型的细胞，并观察到此细　胞具有将氨代谢为尿素的功能；Ｚｈｏｎｇ　２４ｌ研究发现　５％瘀胆血清对骨髓间充质干细胞有一定的促增殖作　用并能有效诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化，联　合使用肝细胞生长因子可以显著提高其分化率。　２．３．３提供特殊的细胞外微环境　随着三维细胞培　养技术的发展，越来越多的证据表明，三维细胞培养　系统比传统二维培养系统更贴近体内的生理条件，能　为干细胞的分化成熟提供理想的组织结构支持，促进　生长因子和细胞外基质相互作用【　。Ｌｉ等　。　利用三维　聚乳酸一乙醇酸支架动态培养大鼠骨髓间充质干细　胞，结果提示三维支架培养较二维培养更能促进骨髓　间充质干细胞向类肝细胞分化，表达更高水平的肝细　胞功能。Ｐｉｒｙａｅｉ等　］￣，Ｋａｚｅｍｎｅｊａｄ等　。　分别利用不　同结构的纳米三维支架成功将骨髓间充质干细胞体　外诱导成类肝细胞。Ｌｉｎ等【２９】用三维藻酸盐支架诱导　骨髓间充质干细胞成功分化为肝样细胞；Ｊｉ　３ｏｌ研究　发现动态培养肝支架具有诱导骨髓问充质干细胞向　肝系细胞分化的能力；联合生长因子诱导骨髓间充质　干细胞向肝系细胞分化的程度显著高于单纯生长因　子诱导。卫金花等【引】在体外用胶原三维培养体系将骨　髓间充质干细胞成功诱导分化为肝细胞并形成具有肝　组织特征性的极化。也有学者利用生物活性材料仿生　构建干细胞外微环境，调控干细胞增殖及其分化，徐　建斌等【３２】研究发现人Ｅ．ｃａｄｈｅｒｉｎ．Ｆｃ融合蛋白作为一　种稳定的仿生细胞间相互作用的细胞外基质联合　ＨＧＦ／ＦＧＦ／ＯＭＳ，Ｄｅｘ等诱导因子共同作用下，可以有　效促进人骨髓间充质干细胞向肝细胞定向分化。　２．３．４细胞基因修饰　Ｉｓｈｉｉ等【　通过四环素上调骨　髓间充质干细胞中ＨＮＦ．３１３的表达，使得骨髓间充质　干细胞分化为类肝细胞内ＡＦＰ、ＴＡＴ和ＥｐＣＡＭ的基因　谢树才．等　骨髓阃充疆干细咆诱导分化为肝细匏的力法及机翩研究ｓ进襞　～ｃ一。憎　表达水平显著升高，并且超过８０％的细胞分泌白蛋　白。Ｃｈｅｎ等【３４１通过腺病毒载体将肝细胞生长因子导　Ｎｏａｈ．１、ｍＲＮＡ＆达都持续降低　Ｋｅ等　】认为Ｎｏｔｃｈ　信号的下调在骨髓间充质干细胞向肝细胞分化过程　中是必要的，并观察到第２１天时Ｊａｇｇｅｄ２、Ｄｅｌｔａ１、　Ｄｅｌｔａ３、Ｎｏｔｃｈ．１、Ｎｏｔｃｈ．２、Ｎｏｔｃｈ．３及Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎ１　入骨髓间充质千细胞使其过表达肝细胞核因子　４ａ（ＨＮＦ．４ａ），结果表明其能促进骨髓间充质干细胞　向肝细胞分化，国内学者利用ｇａｔｅｗａｙ技术将肝细胞　的ｍＲＮＡ￣达量明显较第０，７，１１天降低；柳柯等【４６】　研究发现骨髓间充质干细胞向肝细胞分化第１１天时，　Ｊａｇｇｅｄ２、Ｄｅｌｔａ　１、Ｄｅｌｔａ３、Ｎｏｔｃｈ．１、Ｎｏｔｃｈ一２、Ｎｏｔｃｈ．３　核因子４ａ导入人骨髓间充质干细胞也获得了同样的　结果［３５】。陈丽、崔洁等　通过转染ｐｃＤＮＡ３．１（＋）．　ｈＨＧＦ上调肝细胞生长因子在人骨髓间充质干细胞中　及Ｐｒｅｓｅｎｉｌｉｎｌ的ｍＲＮＡ表达量降低至最低值；通过　Ｊａｇｇｅｄ＿Ｙ－调Ｎｏｔｃｈ信号通路则发现Ｍ２－ＰＫ和ＧＳ．ｒ－Ｐ　的表达，经酒精性肝硬化血清诱导可以促进骨髓间充　质干细胞向肝样细胞分化。　２．３．５　中药诱导及其他诱导方法　Ｏｕｙａｎｇ等ｌ　Ｊ用　红景天苷成功诱导间充质干细胞定向分化为肝细胞，　并认为ＥＲＫＩ／２或ＰＩ３Ｋ信号通路在此过程中发挥了重　要作用；杜超等【３８］用红景天苷联合淤胆血清体外诱导　培养骨髓间充质千细胞，发现红景天苷联合淤胆血清　比传统的淤胆血清更能诱导骨髓间充质干细胞向肝　细胞分化。张玮　为针刺穴位和筋膜可使大鼠血　清细胞因子水平提高，从而促进骨髓间充质干细胞向　肝细胞分化；韩海啸等【４０１用含调肝益气通络方的含药　血清诱导骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞，发现高　剂量组显示出更优于肝细胞生长因子的诱导能力。　Ｐｉｎｇ等　ＩＪ用一贯煎可诱导大鼠骨髓间充质干细胞向　肝细胞样细胞分化，并认为其机制与下调　Ｗｎｔ／１３　ｃａｔｅｎｉｎ信号通路有关。　２．４　骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的机制　已有各　种不同的诱导分化方案被证实可以将骨髓间充质干　细胞成功诱导分化为肝细胞，但是调控这一过程的分　子机制目前还不甚清楚。大量学者认为，骨髓间充质　干细胞向肝细胞的定向分化是基因部分被选择性地　激活或差异性表达，从而控制某一些特异性蛋白合成　和及其空间排布的结果。　、　２－４．１　Ｎｏｔｃｈ信号通路　。Ｎｏｔｃｈ家族是由一组广泛　分化且高度保守的蛋白质组成，通过蛋白质问相互作　用或胞间的信息传递而实现基因转录的调控，已有研　究显，￣．Ｎｏｔｃｈ家族在干细胞的早期分化中发挥重要作　用［４２】，且在肿瘤细胞的增殖分化中也同样起着重要的　作用，当ＮＯａｈ信号通路持续异常存在时细胞不能正　常分化就很可能形成肿瘤【４３］　徐洪雨等　应用肝细胞　生长因子联合成纤维生长因子４诱导骨髓间充质干细　胞向肝细胞分化，结果发现第３天出现分化细胞，．　Ｎｏｔｃｈ．１蛋白表达开始降低，Ｎａｔｃｈ．１　ｍＲＮＡ表达也随　之减低，而且随着分化率的升　，　Ｎｏｔｃｈ一１蛋白和　表达明显晚于对照组，而且至第２６天都未表达白蛋　白，都证明了下调Ｎｏｔｃｈ信号通路可以促进骨髓间充　质干细胞分化为肝细胞。　２．４．２　Ｗｎｔ／ｌ￣．ｃａｔｅｎｉｎ信号通路Ｗｎｔ／１３．ｃａｔｅｎｉｎ信号　通路在肝细胞形成过程发挥了重要作用，Ｗｉｌｌｉａｍｓ　等［４７】阻断此通路结果是卵圆细胞未分化为肝细胞。平　键等【　０】发现一贯煎可诱导大鼠骨髓间充质干细胞向　肝细胞样细胞分化，其机制与下调Ｗｎｔ／Ｂ．ｃａｔｅｎｉｎ４￣号　通路有关。Ｋｅ等【　９］在骨髓间充质干细胞分化为肝细　胞过程中观察到Ｗｎｔ．１和Ｗｎｔ．５ａ的ｍＲＮＡ水平显著　低于第０，ｌ７，１１天，并且发现用Ｄｋｋｌ抑制Ｗｎｔ．１信号　诱导骨髓间充质干细胞更早表达白蛋白，相反，上调　Ｗｎｔ－１信号抑制骨髓间充质干细胞分化为肝细胞，都　证明了下调Ｗｎｔ．／ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ信号通路促进了骨髓间　充质干细胞向肝细胞分化　也有研究者在骨髓间充质　干细胞向软骨细胞分化过程中发．％Ｗｎｔ／ｌ￣．ｃａｔｅｎｉｎ与　ＴＧＦ－Ｉ￣／Ｓｍａｄ信号通路通过ｐ．ｃａｔｅｎｉｎ存在交叉Ｌｂ川，　Ｌｉ等【５’　证实了下调转化生长因子Ｂ通路有可能促进骨　髓间充质千细胞向肝细胞的分化。　、　２．４．３　ｐ３８信号通路Ｆｏｒｔｅ　发现肝细胞生长因　子通过ｐ３８４￣号通路的参与促进间充质干细胞增殖，　通过ＰＩ３Ｋ信号通路促进其迁移；Ｗａｎｇ等Ｌｂ刮研究证明　转化生长因子通过ＭＥＫ，ｐ３８，ＰＩ．３Ｋ信号通路刺激　间充质干细胞产生肝细胞生长因子　杨超等【５　】通过加　＞￣ｐ３８信号转导通路抑制剂ＳＢ２０３５８０诱导骨髓间充　质干细胞向肝细胞分化，与正常诱导组相比　其可以　减少骨髓问充质干细胞分化为肝细胞的比侈ｎ由此认　为丝裂原激活蛋白酶Ｐ３８在损伤肝脏条件培养液中诱　导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞过程中起重要作　用，　其可能机制为ｐ３８是骨髓间充质干细胞产生肝细　胞生长因子的重要通路，再由肝细胞生长因子刺激骨　髓间充质干细胞分化为肝细胞。　’　２．４，４　ｍｉＲ－１２２及钙离子的影响　ｍｉＲ　１２２是成熟肝　户Ｏ．Ｂｏｘ　１０００２，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１０１８０　ｗｗｗ．ＣＲＴＥＲ．ｏｒｇ　谢捷才　等　骨髓闻充质干细泡诱导分化为盱细胞的力法及机钠研究与进震　一　珊伽　细胞特异性高表达的一种ｍｉＲＮＡ，在肝细胞生长、成　熟、分化、调节细胞代谢过程中发挥了重要作用Ｌ５副，　Ｚｅｉｓｅｌ　５６　研究发现ｍｉＲ．１２２在肝脏干细胞以及肝癌　细胞等分化不成熟的细胞中低表达，当诱导分化为成　熟细胞后，ｍｊＲ＿１　２２表达显著升高；Ｃｕｉ　即Ｊ发现７种　异位表达的ｍｉＲＮＡ（ｍｉＲ．１２４６，ｍｉＲ．１２９０，ｍｉＲ－１４８ａ，　ｍｉＲ．３０ａ，ｍｉＲ－４２４，ｍｉＲ．５４２—５ｐ，ｍｉＲ一１　２２）过量表　达可以促进间充质干细胞分化为成熟的肝细胞。　Ａｌｉｚａｄｅｈ　５８】发现曲古霉素Ａ可以促进脂肪来源间充　质干细胞向肝样细胞分化并提高ｍｉＲ．１２２的表达水平，　赵民学等【５０　研究表明上调ｍｉＲ．１２２表达水平能促进骨　髓间充质干细胞向肝样细胞分化。　焦淑贤等　用钙离子拮抗剂尼莫地平对诱导分　化中的骨髓间充质干细胞进行干预，结果显示肝样分　化细胞较对照组明显减少，提示ｃａＺ＋不仅参与了细胞　因子诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞的分化过程，　也影响了骨髓间充质干细胞的正常代谢，其可能的原　因是骨髓间充质干细胞的分化受到基质金属蛋白酶　及其抑制物的调节，而基质金属蛋白酶需要Ｃａ　金属　离子作为辅助因子【　’一。　。　３结论Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　骨髓间充质干细胞诱导分化肝细胞为组织工程　提供足够的种子细胞来源，为细胞移植和人工肝治　疗重症肝病带来了曙光。虽然骨髓间充质干细胞分　化为肝细胞在动物肝脏疾病模型上进行移植取得了　一定的疗效，但是其真正应用于临床的路还很漫长，　许多问题还有待解决：①目前的研究尚未发现骨髓　间充质千细胞特异性的表面标志物，如何扩增骨髓　间充质干细胞的同时又能保持其良好的分化潜能；　②骨髓间充质干细胞诱导分化为肝细胞的机制研究　尚少，其具体的调控机制需要进一步的研究；通过　对机制的进一步研究找到更为安全有效的方法，　既　能控制骨髓问充质干细胞向肝细胞定向诱导分化又　能提高其向肝细胞的分化率；③骨髓间充质千细胞分　化的肝细胞移植入体内是否会导致肿瘤或肝纤维化　的发生等需要进一步的探讨。虽然骨髓间充质干细胞　分化为肝细胞运用于临床治疗各种终末期肝病的过　程困难重重，但是骨髓问充质千细胞是一种有着巨大　分化潜能和极具临床应用前景的干细胞，积极寻求骨　髓间充质干细胞的分离培养的最佳条件，提高肝细胞　的分化率、探讨其肝向诱导分化的分子机制和临床运　ＩＳｓＮ　２０９５－４３４４　ｃＮ　２１—１　５８１，Ｒ　ｃｏＯＥＮ：ｚＬＫＨＡＨ　用的安全性将成为下一步的工作重心。　考ｊ　ｆ．构思设计综述为谢树才，资料收集为谢树　才，分析和并解析数据为谢树才、蒋锡丽，周帅及张剑权　负责文章修改。　益糯所有作者共同认可文章无相关利益冲突。　伦理　没有与相关伦理道德冲突的内容。　之孝查　文章出版前已经过ＣＮＫＩ反剽窃文献检测　系统进行３次查重。　营　密文章经国内小同行外审专家双盲外审，符　合本刊发稿宗旨。　考翩　第一作者对研究和撰写的论文中出现的不　端行为承担责任。论文中涉及的原始图片、数据（包括计算　机数据库）记录及样本已按照有关规定保存、分享和销毁，　可接受核查。　考　文章出版前杂志已与全体作者授权人签署　了版权相关协议。　４　参考文献　Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓ　【１】　Ｇｉｌｃｈｒｉｓｔ　ＥＳ，Ｐｌｅｖｒｉｓ　ＪＮ．Ｂｏｎｅ　ｍａｒ、ｒｏＷ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ｌｉｖｅｒ　ｒｅｐａ‘ｉｒ：１　０　ｙｅａｒｓ　ｄｏｗｎ　ｔｈｅ　ｌｉｎｅ．Ｌｉｖｅｒ　，　Ｔｒａｎｓｐ１．２０１０；１６（２）：１１８－１２９．　【２】　Ｓｔｉｅｇｅｒ　Ｂ，Ｐｅｔｅｒｓ　Ｒ，Ｓｉｄｌｅｒ　ＭＡ，ｅｔ　ａ１．Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ　ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌＩｓ．Ｓｗｉｓｓ　Ｍｅｄ　Ｗｋｌｙ．　２００７；１　３７　Ｓｕｐｐｌ　１　５５：５５Ｓ一５９Ｓ．　．　一　【３】Ｈｏｎｇ　ＨＳ，Ｋｉｍ　ＹＨ，Ｓｏｎ丫Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ　ｏｎ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅＩＩｓ：ｔｉｓｓｕｅ　ｒｅｐａｉ　ｉｍｍｕｎｅｍ１ｏｄｕｌａｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｔｕｍｏｒ　ｈｏｍｉｎｇ．Ａｍｈ　Ｐｈａｒｍ　Ｒｅｓ　．２０１　２　３５（２）：２０１—２１１．　　；．　、・　【４】　ＩＦｒｉｅｄｅｎｓｔｅｉｎ　ＡＪ，Ｃｈａ！ｌａｋｈｙａｑ　ＲＫ，Ｇｅｒａｓｉｍｏｖ　ＵＶ．　Ｂ１ｏｎｅ　ｍａｒ　ｒｏＷ　．ｏｓｔｅ０ｇｅｎｊｃ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌ　ｌｓ：ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｃｕ　ｌｔｉｖａｔｉｏｎ　—ａｎｄ　ｔｒａｎｓｐ［ａｎｔａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｄｉ伽ｓｉｇｎ　ｃｈａｍｂｅｒｓ一．ＣＩｅｌｌ　Ｔｉｓｓｕｅ　Ｋｉｎｅｔ．１　９８７；２０（３）：２６３－２７２．　、　．、　【５　５］Ｈａｎｇ　ＨＬ，Ｘｉａ　Ｑ．Ｒｏｌｅ　ｏｆ　ＢＭＳＣｓ　ｉｎ．１ｉｖｅｒ　ｒｅｇ　ｅｎｅｒａ　ｔｉｏｎａｎｄ　ｍｅｔａｓｔａｓｉ，１　ｓ　ａｆｔｅｒ　ｈｅｐａｔｅｃｔｏｍｙ．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ、　．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏ１．２０　１４　２０（１＿）：１２６ｒｌ３２．　｛．　‘　【６】Ｌｉ　Ｗ，Ｌｉｕ　ＳＮ，Ｌｕ　ｏ　ＤＤ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａ，ｔｉｏｎ　ｏｆ・　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｏｉｄ　ｃｅｌｌ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｆｒｏｍ　ｗｈｏｌｅ：ｂｏｎｅ－ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｒａｔ　ｍｙｅｌｏｉｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍ￣ｓｔｅｍＩ　ｃｅｌｌｓ．　Ｗｏｒｌｄ　ＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏ１．２００６；１２（３０）：４８６６－４８６９．　【７】　Ｓｒｅｅｊｉｔ　Ｄｉｌｉｐ　ＫＢ，Ｖｅｒｍａ　ＲＳ．Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ，ｏｆ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅｓ　ｆｒｏｍ　ｍｕｒｉｎｅ　ｂｏｎｅ　ｍｌａｒｒｏｗ．Ｃｅｌｌ　Ｔｉｓｓｕｅ　Ｒｅｓ．２０１　２；３５０（１）：５５－６８．　【８】　向俊西，郑幸龙，祝旭龙，等．骨髓间充质干细胞体外培养及　肝向分化方案的优化【Ｊ】．南方医科大学学报，２０１５，３５（８）：　１０９０．１０９６．　７５９１　谢树才，等．骨髓闯充质于细胞诱导分化为奸细胞的方法及祝翩研究ｓ进疑　ＷＷＷ．ＣＲＴＥＲ．ｏｒｇ　【９】Ｈａｓｅｂｅ　Ｈａｓｅｇａｗａ　Ｓ，Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｕｓｉｎｇ　ｃｅｌｌ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｍａｒｋｅｒｓ　ｉｎ　【２４】Ｚｈｏｎｇ　Ｘ，Ｗａｎ　Ｊ，Ｗａｎｇ　Ｚ，ｅｔ　ａ１．Ｃｈｏｌｅｓｔａｔｉｃ　ｓｅｒｕｍ　ａｎｄ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎｄｕｃｅ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｅｒｍｉｓ．Ｊ　Ｄｅｒｍａｔｏｌ　Ｓｃｉ．２０１　１；６２（２）：９８—１　Ｏ６．　【１０】Ｐｏｌｉｓｅｔｔｉ　Ｎ，Ｃｈａｉｔａｎｙａ　ＶＧ，Ｂａｂｕ　ＰＰ，ｅｔ　ａ１．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｏｆ　ｒａｔ　ｖｉｔｒｏ．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ　Ｘｉｕ　Ｆｕ　Ｃｈｏｎｇ　Ｊｉａｎ　Ｗａｉ　Ｋｅ　Ｚａ　Ｚｈｉ．　２０１　０；２４（３）：３４４－３４９．　【２５】Ｓｚｏｔ　ＣＳ，Ｂｕｃｈａｎａｎ　ＣＦ，Ｆｒｅｅｍａｎ　ＪＷ，ｅｔ　ａ１．３Ｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｓｔｒｏｍａｌ　ｃｅｌｌｓ．Ｎｅｕｒｏｌ　Ｉｎｄｉａ．２０１　Ｏ；５８（２）：　２０１．２０８．　【１　１】季茹．肝脏脱细胞生物支架的制备及诱导骨髓问充质干　细胞肝向分化的研究【Ｄ］．西安：第四军医大学，２０１３．　【１　２】Ｔａｉ　ＢＣ，Ｄｕ　Ｃ，Ｇａｏ　Ｓ．ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｕｓｅ　ｏｆ　ａ　ｐｏｌｙｅｌｅｃｔｒｏｌｙｔｅ　ｆｉｂｒｏｕｓ　ｓｃａｆｆｏｌｄ　ｔｏ　ｄｅｌｉｖｅｒ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ　ｈＭＳＣｓ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｌｉｖｅｒ．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ．２０１　０；３１（１）：４８—５７．　【１３】Ｓｈｉ　ＸＬ，Ｍａｏ　Ｌ，Ｘｕ　Ｂ　ｅｔ　ａ１．Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎ　ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　ｄｉｒｅｃｔｅｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｎｇ　ｍｏｕｓｅ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ．Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏｌ　Ｉｎｔ．２Ｏ０８：３２（８）：９５９．９６５．　【１４】Ｗａｎｇ　ＰＰ，Ｗａｎｇ　ＪＨ，Ｙａｎ　ＺＰ，ｅｔ　ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ　ｉｎ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｓｔｒｏｍａｌ　ｃｅｌｌｓ　ａｆｔｅｒ　ＨＧＦ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ．Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ｒｅｓ　Ｃｏｍｍｕｎ．２００４；３２Ｏ（３）：７１２．７１６．　［１　５】Ｉｓｈｉｋａｗａ　Ｔｅｒａｉ　Ｓ，Ｕｒａｔａ　ｅｔ　ａ１．Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　２　ｆａｃｉｌｉｔａｔｅｓ　ｔｈｅ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ．Ｃｅｌｌ　Ｔｉｓｓｕｅ　Ｒｅｓ．　２００６；３２３（２）：２２１－２３１．　【１６】胡晶，牟玲，罗恩杰．体外诱导骨髓问充质干细胞向肝细胞　样细胞方向分化【Ｊ］．微生物学杂志，２００８，２８（３）：３０—３３．　［１７】王佐周，胡晶，牟玲，等．成纤维生长因子－２与肝细胞生长因　子诱导骨髓间充质干细胞分化为肝细胞样细胞的作用比　较【Ｊ】＿微生物学杂志，２０１０，３０（４）：６３—６７．　【１　８】Ａｙａｔｏｌｌａｈｉ　Ｍ，Ｓｏｌｅｉｍａｎｉ　Ｍ，Ｔａｂｅｉ　ＳＺ，ｅｔ　ａＩ．　Ｈｅｐａｔｏｇｅｎｉｃ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｉｎｓｕｌｉｎ　ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ－Ｉ．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｓｔｅｍ　Ｃｅｌｌｓ．２０１１；３（１２）：１１３－１２１．　【１９】Ｓｕｎ　Ｓ，Ｃｈｅｎ　Ｇ，Ｘｕ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｍｉｇｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｓｐｌｅｅｎ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　ｐｏｒｔａｌ　ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．ＰＬｏＳ　Ｏｎｅ．２０１　３；８（１　２）：ｅ８３５２３．　［２０１曹亮，胡祥，安伟德，等．不同细胞因子体外诱导骨髓间充质　干细胞定向肝细胞分化的研究［Ｊ】．中华实验外科杂志，　２００６，２３（７）：８７１．　【２１】Ｓａｕｌｎｉｅｒ　Ｎ，Ｌａｔｔａｎｚｉ　Ｗ。Ｐｕｇｌｉｓｉ　ＭＡ，ｅｔ　ａ１．Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａ　●　．　１　１　．　．　【２２】范莎莎，石泳中，袁友红，等．肝纤维化大鼠血清体外诱导骨　髓间充质干细胞向肝细胞的分化［Ｊ】．中国组织工程研究　与临床康复，　１。１　．　．　【　】　Ｉ，　，　．　，　，　－　●　．　１：１　－１６４．　ｂｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ　ｔｕｍｏｒｓ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｌ　ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ．　Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ．２０１　１；３２（３１　１：７９０５．７９１　２．　【２６】Ｌｉ　Ｊ，Ｔａｏ　Ｒ，Ｗｕ　Ｗ，ｅｔａ１．３Ｄ　ＰＬＧＡｓｃａｆｆｏｌｄｓ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ．Ｓｔｅｍ　Ｃｅｌｌｓ　Ｄｅｖ．２０１０：１９（９）：１４２７—１４３６．　【２７】Ｐｉｒｙａｅｉ　Ａ，Ｖａｌｏｊｅｒｄｉ　ＭＲ，Ｓｈａｈｓａｖａｎｉ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．　Ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ・ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅ　ｃｅｌＩｓ　ｏｎ　ｎａｎｏｆｉｂｅｒｓ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　ａ　ｃａｒｂｏｎ　ｔｅｔｒａｃｈｌｏｒｉｄｅ－　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｌｉｖｅｒ　ｆｉｂｒｏｓｉｓ　ｍｏｄｅ１．Ｓｔｅｍ　Ｃｅｌｌ　Ｒｅｖ．２０１　１：７（１）：　１０３－１１８．　【２８】Ｋａｚｅｍｎｅｊａｄ　Ｓ，Ａｌｌａｍｅｈ　Ａ，Ｓｏｌｅｉｍａｎｉ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｅｐａｔｏｃｙ　ｔｅ－ｌｉｋｅ　ｃｅｌｌｓ　ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒＯｍ　ｈｕｍａｎ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｏｎ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｔｈｒｅｅ—ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ　ｂｉｏｃｏｍｐａｔｉｂｌｅ　ｎａｎｏｆｉｂｒｏｕｓ　ｓｃａｆｆｏｌｄ．Ｊ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ　Ｈｅｐａｔｏ１．２００９：２４（２）：２７８－２８７．　【２９】Ｌｉｎ　Ｎ，Ｌｉｎ　Ｊ，Ｂｏ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅ　ｃｅｉｌｓ　ｉｎ　ａｎ　ａｌｇｉｎａｔｅ　ｓｃａｆｆｏｌｄ．Ｃｅｌｌ　Ｐｒｏｌｉｆ．　２０１　０；４３（５）：４２７－４３４．　【３Ｏ】Ｊｉ　Ｒ，Ｚｈａｎｇ　Ｎ，Ｙｏｕ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＭＳＣｓ　ｉｎｔｏ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ．１ｉｋｅ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　ａ　ｌｉｖｅｒ　ｂｉｏｍａｔｒｉｘ　ｓｃａｆｆｏｌｄ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｔｒａｎｓＤＩａｎｔａｔＩＯｎ　ｉｎｔｏ　ｌｉｖｅｒ－ｆｉｂｒｏｔｉｃ　ｍｉｃｅ　Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ．２０１　２：３３（３５）：８９９５．９００８．　【３１】卫金花，曲强，杨阳，等．体外三维培养骨髓间充质干细胞诱　导分化为肝细胞及其极化特征【Ｊ】．基础医学与临床，　２０１　２，３２（６）：６３９—６４３．　【３２】徐建斌，张妍，李素华，等．人Ｅ钙粘素融合蛋白基质对人骨　髓间充质干细胞向肝细胞定向诱导分化的影响研究【Ｊ】．　中国生物医学工程学报，２０１３，３２（６）：７０８—７１５．　【３３】Ｉｓｈｉｉ　Ｋ，Ｙｏｓｈｉｄａ　Ｙ，Ａｋｅｃｈｉ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｈｅｐａｔｉｃ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ．ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｂｙ　ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ—ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ｎｕｃｌｅａｒ　ｆａｃｔｏｒ　３ｂｅｔａ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２００８；　４８（２）：５９７—６０６．　【３４】Ｃｈｅｎ　ＭＬ，Ｌｅｅ　ＫＤ，Ｈｕａｎｇ　ＨＣ，ｅｔ　ａ１．ＨＮＦ－４ａ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｓ　ｈｅｐａｔｉｃ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｆｒ０ｍ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ．Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏ１．２０１　０：１　６（４０）：５０９２．５１　０３．　【３５】谢佩怡．胡晓俊，陈俊伟，等．过表达肝细胞核因子４ａｌｐｈａ对　人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化的作用【Ｊ】．中国医　学影像技术，２０１４，３０（７）：９９１－９９５．　ＰＯ．Ｂｏｘ　１０００２，Ｓｈｅｎｙａｎｇ　１１０１８０　ｗｗｗ．ＣＲＴＥＲ．ｏｒｇ　谢树才　等　骨髓闻充磺于细胞诱导分化为秆细跑的方法及机翩研究ｓ进展　ｗⅥ　ＣＲＴＥＲ．ｏｒｇ　【３６】陈丽，崔洁，侯军霞。等．上调ｈＨＧＦ促进人骨髓间充质干细　胞向肝样细胞分化【Ｊ】＿免疫学杂志，２０１１，２７（１）：３７－４１．　【３７】Ｏｕｙａｎｇ　ＪＦ，Ｌｏｕ　Ｊ，Ｙａｎ　Ｃ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎ—ｖｉｔｒｏ　ｐｒｏｍｏｔｅｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｔｏｗａｒｄｓ　ｈｅｐａｔｏｃ￣ｅｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｓａｌｉｄｒｏｓｉｄｅ．Ｊ　Ｐｈａｒｍ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ。２０１　０；６２（４）：５３０—５３８．　【３８】杜超，蒋明德，曾维政，等．红景天苷与淤胆血清诱导骨髓问　充质干细胞向肝样细胞分化【Ｊ】．中国组织工程研究，　２０１　３，１　７（４９）：８５１　２—８５１　９．　【３９】张玮，郑志忠，赵福建，等．针刺穴位与筋膜对骨髓间充质　干细胞定向分化的体外机制研究【Ｊ】＿世界科学技术．中医　药现代化，２０１４，１６（１１）：２４００—２４０５．　［４０】韩海啸，李军祥，孟捷，等．调肝益气通络方药物血清诱导　骨髓间充质干细胞转化为肝细胞的研究【Ｊ】＿世界中西医　结合杂志，２０１　３，８（９）：８８２—８８５．　［４１】Ｐｉｎｇ　Ｊ，Ｃｈｅｎ　Ｈ　Ｙａｎｇ　Ｚ，ｅｔ　ａ１．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆＹｉｇｕａｎ　Ｄｅｃｏｃｔｉｏｎ　ｏｎ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅ　ｃｅｌｌｓ：ａｎ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｒｅｓｅａｒｃｈ．Ｚｈｏｎｇｇｕｏ　Ｚｈｏｎｇ　Ｘｉ　Ｙｉ　Ｊｉｅ　Ｈｅ　Ｚａ　Ｚｈｉ．２０１４：３４（３）：３４８－３５４．　【４２】Ｗａｎｇ　Ｙｏｕ　Ｎ，ｒａｏ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ｎｏｔｃｈ　ｉｓ　ｔｈｅ　ｋｅｙ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｆｅｔａｌ　ｌｉｖｅｒ　ｓｔｅｍ／ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ　ｃｅｌｌｓ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃ￣ｅｓ．Ｄｅｖ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｄｉｆｅｒ．　２０１　２；５４（５）：６０５－６１　７．　【４３】Ｗａｌｌ　ＤＳ，Ｍｅａｒｓ　ＡＪ，ＭｃＮｅｉｌｌ　Ｂ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｒｅｔｉｎａ　ｉｓ　ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｏｎ　Ｉ　Ｏｔｃｈ—ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　Ｓｏｎｉｃ　ｈｅｄｇｅｈＯｇ／Ｈｅｓ１　ａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｊ　Ｃｅｌｌ　Ｂｉｏ１．２００９；１８４（１１：１０１－１１２．　【４４】徐洪雨，王瑞峰，李宝杰．Ｎｏｔｃｈ．１蛋白在诱导骨髓间充质　干细胞向肝细胞分化中的表达［Ｊ】．哈尔滨医科大学学报，　２００９，４３（２）：１　２２－１　２５．　［４５】Ｋｅ　Ｚ，Ｍａｏ　Ｘ，Ｌｉ　Ｓ，ｅｔ　ａＩ．Ｄｙｎａｍｉｃ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　Ｎｏｔｃｈ　ｓｉｇｎａｌ　ｉｎ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ．Ｔｉｓｓｕｅ　Ｃｅｌ１．２０１　３：　４５（２）：９５－１　００．　［４６】柳柯，刘桂英，杨洋，等．Ｎｏｔｃｈ信号通路在骨髓间充质干细　胞向肝细胞分化过程中的动态表达特征【Ｊ】＿中国临床解　剖学杂志，２０１３，３１（３）：３０８－３１３．　［４７】Ｗｉｌｌｉａｍｓ　ＪＭ，Ｏｈ　ＳＨ，Ｊｏｒｇｅｎｓｅｎ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｒｏｌｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｗｎｔ　ｆａｍｉｌｙ　ｏｆ　ｓｅｃｒｅｔｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｉｎ　ｒａｔ　ｏｖａｌ”ｓｔｅｍ”　ｃｅｌｌ—ｂａｓｅｄ　ｌｉｖｅｒ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ：Ｗｎｔｌ　ｄｒｉｖｅｓ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ａｍ　Ｊ　Ｐａｔｈｏ１．２０１　０；１　７６（６）：２７３２—２７４２．　【４８】平键，陈红云，周扬，等．一贯煎诱导骨髓间充质干细胞分　化为肝细胞样细胞的实验研究【Ｊ】＿中国中西医结合杂志，　２０１　４，３４（３）：３４８－３５４．　［４９】Ｋｅ　Ｚ，Ｚｈｏｕ　Ｆ’Ｗａｎｇ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｄｏｗｎ－ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｗｎｔ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ　ｃｏｕｌｄ　ｐｒｏｍｏｔｅ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｔｏ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ｒｅｓ　Ｃｏｍｍｕｎ．　２００８：３６７（２）：３４２—３４８．　｜ｓｓＮ　２０９５．４３４４　ＣＮ　２１．１　５８１，Ｒ　ｃｏＤＥＮ：ｚＬＫＨＡＨ　【５０】ｖａｎ　Ｐｏｌｌ　Ｄ，Ｐａｒｅｋｋａｄａｎ　Ｂ，Ｃｈｏ　ＣＨ，ｅｔ　ａ１．　Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ｄｉｒｅｃｔｌｙ　ｍｏｄｕｌａｔｅ　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｄｅａｔｈ　ａｎｄ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｉｎ　ｖｉｖｏ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２００８；４７（５）：１　６３４－１　６４３．　【５１】Ｌｉ　Ｚｈｕ　Ｊ，Ｍａ　Ｋ，ｅｔ　ａ１．Ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ—－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ　ｐｒｏｍｏｔｅｓ　ｌｉｖｅｒ　ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ａｆｔｅｒ　ｐｏｒｔａｌ　ｖｅｉｎ　ｅｍｂｏｌｉｚａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｃｉｒｒｈｏｔｉｃ　ｒａｔｓ．Ｊ　Ｓｕｒｇ　Ｒｅｓ．２０１　３：　１８４（２）：１１６１．１１７３．　【５２】Ｆｏｒｔｅ　Ｇ，Ｍｉｎｉｅｒｉ　Ｍ，Ｃｏｓｓａ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ：ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，　ｍｉｇｒａｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｓｔｅｍ　Ｃｅｌｌｓ．２００６；２４（１）：　２３．３３．　【５３】Ｗａｎｇ　Ｗｅｉｌ　ＢＲ，Ｈｅｒｒｍａｎｎ　ＪＬ，ｅｔ　ａ１．ＭＥＫ，ｐ３８，ａｎｄ　ＰＩ－３Ｋ　ｍｅｄｉａｔｅ　ｃｒｏｓｓ　ｔａｌｋ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ＥＧＦＲ　ａｎｄ　ＴＮＦＲ　ｉｎ　ｅｎｈａｎｃｉｎｇ　ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｆｒＯｍ　ｈｕｍａｎ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ．Ａｍ　Ｊ　Ｐｈｙｓｉｏｌ　Ｃｅｌｌ　Ｐｈｙｓｉｏ１．２００９；２９７（５）：Ｃ１　２８４．１　２９３．　【５４】杨超，董学君．ｐ３８信号通路在小鼠骨髓间充质干细胞体　外分化肝细胞中的作用［Ｊ】．医学研究杂志，２０１１，４０（１）：　８５—８８．　【５５】Ｒｏｄｅｒｂｕｒｇ　Ｃ，Ｂｅｎｚ　Ｆ’Ｖａｒｇａｓ　Ｃａｒｄｅｎａｓ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．　Ｅｌｅｖａｔｅｄ　ｍｉＲ一１　２２　ｓｅｒｕｍ　ｌｅｖｅｌｓ　ａｒｅ　ａｎ　ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ｍａｒｋｅｒ　ｏｆ　Ｉｉｖｅｒ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ　ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｌｉｖｅｒ　Ｉｎｔ　２０１５：３５（４）：１１７２—１１８４．　【５６】Ｚｅｉｓｅｌ　ＭＢ，Ｐｆｅｆｆｅｒ　Ｓ，Ｂａｕｍｅｒｔ　Ｔ　ｍｉＲ．１　２２　ａｃｔｓ　ａｓ　ａ　ｔｕｍｏｒ　ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ　ｉｎ　ｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ　ｉｎ　ｖｉｖｏ．Ｊ　Ｈｅｐａｔｏ１．２０１　３；５８（４）：８２１－８２３．　【５７】Ｃｕｉ　Ｌ，Ｓｈｉ丫Ｚｈｏｕ　Ｘ，ｅｔ　ａ１．Ａ　ｓｅｔ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ　ｍｅｄｉａｔｅ　ｄｉｒｅｃｔ　ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｕｍｂｉｌｉｃａｌ　ｃｏｒｄ　ｌｉｎｉｎｇ－ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｉｎｔｏ　ｈｅｐａｔｏｃ￣ｅｓ．Ｃｅｌｌ　Ｄｅａｔｈ　Ｄｉｓ．２０１　３；４：ｅ９１　８．　【５８】Ａｌｉｚａｄｅｈ　Ｅ，Ｅｓｌａｍｉｎｅｊａｄ　ＭＢ，Ａｋｂａｒｚａｄｅｈ　Ａ，ｅｔ　ａ１．　Ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＭｉＲ．１　２２　ｖｉａ　Ｔｒｉｃｈｏｓｔａｔｉｎ　Ａ　Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ　ｉｎ　Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅ　Ｃｅｌｌｓ　Ｄｅｒｉｖｅｄ　ｆｒ０ｍ　Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　Ｓｔｅｍ　Ｃｅｌｌｓ．Ｃｈｅｍ　Ｂｉｏｌ　Ｄｒｕｇ　Ｄｅｓ．２０１　６；８７（２）：２９６—３０５．　【５９１赵民学，李柏文，王德盛，等．ｍｉＲ－１２２在骨髓问充质干细胞　治疗大鼠急性肝损伤中的作用【Ｊ】．吉林大学学报：医学版，　２Ｏ１５，４１（６）：１１５Ｏ．１１５３．　【６０】焦淑贤，胡彬，赵林，等．Ｃａｚ＋参与骨髓间充质干细胞存活　增殖及向肝细胞的诱导分化【Ｊ】．中国组织工程研究，２０１３　１　７（４０）：７０２８．７０３３．　【６　１】Ｌｉ　Ｘ，Ｓｏｎｇ　Ｇ　Ｒｏｌｅｓ　ｏｆ　ｍａｔｒｉｘ　ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ　ｉｎ　ｍｉｇｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｂｏｎｅ　ｍａｒｒｏｗ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ．Ｓｈｅｎｇ　Ｗｕ　Ｙｉ　Ｘｕｅ　Ｇｏｎｇ　Ｃｈｅｎｇ　Ｘｕｅ　Ｚａ　Ｚｈｉ．２０１　２：２９（２）：３８７—３９１，３９６．　【６２】Ｌｕ　Ｃ，Ｌｉ　Ｘ、　Ｈｕ　ｅｔ　ａ１．ＭＴ１－ＭＭＰ　ｃｏｎｔｍｌｓ　ｈｕｍａｎ　ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ　ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ　ａｎｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．　Ｂｌｏｏｄ．２０１０：１１５（２）：２２１．２２９．　７５９３