项目三 盐酸精氨酸注射液的制备

一、定义

注射剂（injection）系指药物制成的供注入体内的无菌溶液（包括乳浊液和混悬液）以及供临用前配成溶液或混悬液的无菌粉末或浓溶液。

注射剂作用迅速可靠，不受pH、酶、食物等影响，无首过效应，可发挥全身或局部定位作用，适用于不宜口服药物和不能口服的病人，但注射剂研制和生产过程复杂，安全性及机体适应性差，成本较高。

二、分类

1、按分散系统分：

溶液型注射剂、混悬液型注射剂、乳浊液型注射剂、注射型无菌粉末 2、按给药途径分：

经脉注射剂、肌内注射剂、皮下注射剂、椎管注射剂 3、其它分类：

穴位注射、关节腔注射、腹腔注射、心内注射、皮下注射、滑膜腔内注射、鞘腔内注射等。某些抗肿瘤药物还可动脉内注射，直接进入靶组织，提高疗效，降低毒副作用。

三、特点

优点：

1、药效迅速，作用可靠。 2、适用于不宜口服给药的患者。 3、适于不宜口服的药物。 4、产生局部的定位作用。 5、靶向作用。 缺点：

1、使用不方便，注射时疼痛； 2、易交叉污染，安全性较差；

3、生产过程复杂，质量要求高，成本高。

四、质量要求

1、无菌；注射剂内不应含有任何活的微生物，必须符合《中国药典》无菌检查的要求。

2、无热原：注射剂内不应含热原，特别是用量一次超过5ml以上、供静脉注射或脊椎注射的注射剂，必须是热原检查合格的。

3、可见异物：按可见异物检查法（包括灯检法和光散射法）检查，不得含有可见的异物或混悬物。

4、安全性：注射剂必须对机体无毒性反应和刺激性。

5、等渗压：对用量大、供静脉注射的注射剂应具有与血浆相同的或略偏高的渗透压。

6、pH值：注射剂应具有与血液相等或相近的pH值（血液的pH值约为7.4），一般应控制在pH4~9范围内。

7、稳定性：注射剂必须具有必要的物理稳定性和化学稳定性，以确保产品在贮存期安全、有效。

此外，有些注射剂还应检查是否有溶血作用、致敏作用等，对不合规格要求的严禁使用。

五、热原

热原是微生物的尸体及其代谢产物。大多数微生物均能产生热原，但致热能力最强的是革兰氏阴性杆菌所产生的热原。

热原是微生物产生的一种内毒素，由磷脂、脂多糖和蛋白质等所组成，其中脂多糖具有特别强的致热性和耐热性。热原的分子量一般为10×105左右，分子量越大，致热作用越强。注入体内的输液中含热原量达1μg/kg时就可引起热原反应。

含有热原的输液进入体内后，有约30分钟的潜伏期，就使人体体温迅速上升，伴有寒颤、头痛、出汗、恶心呕吐；严重者体温达40℃，出现昏迷、虚脱，甚至有生命危险。

（一）热原的性质

1. 耐热性：热原在100℃加热1小时不被分解破坏，180℃/3-4小

时、200℃/60min、250℃/30-45min或650℃/1min可使热原彻底破坏。因此，玻璃制品如生产过程中所用的容器和注射时使用的注射器等，均可用高温破坏热原。

2. 水溶性：热原能溶于水，似真溶液。但其浓缩液带有乳光，故带有乳光的水和药液，热原不合格。生产时所用的各种管道可用大量注射用水冲洗以除去热原。

3. 不挥发性：热原本身不挥发，但可随水蒸汽雾滴带入蒸馏水中，故用蒸馏法制备注射用水时，蒸馏水器应有隔沫装置。

4. 滤过性：热原与细菌的毒素一样，能通过一般滤器进入滤液中，即使是微孔滤膜也不能截留。但活性炭能吸附热原，从而将热原滤过除去；超滤装置也可除去热原。

5. 不耐强酸、强碱、强氧化剂：热原能被盐酸、硫酸、氢氧化钠、高锰酸钾、重铬酸钾等所破坏。

6. 其它：超声波或阴树脂也能一定程度上破坏或吸附热原。

（二）热原的去除方法

1、活性炭吸附法：即在配液时加入0.1-0.5%（溶液体积）的针用一级活性炭，煮沸并搅拌15分钟，即能除去大部分热原，而且活性炭还有脱色、助滤、除用。但活性炭也会吸附部分药液，故使用时应过量投料，但小剂量药物不宜使用。

2、 离子交换法：热原在水溶液中带负电，可被阴树脂所交换，但树脂易饱和，须经常再生

3、 凝胶过滤法：凝胶为一分子筛，利用热原与药物分子量的差异，将两者分开。但当两者分子量相差不大时，不宜使用。

4、 超滤法：超滤膜的膜孔仅为3.0-15nm，故可有效去除药液中的细菌与热原。

5、 酸碱法：因热原能被强酸、强碱或强氧化剂等破坏，所以玻璃容器、用具及输液瓶等均可使用重铬酸钾硫酸清洁液浸泡以破坏热原。

6、 高温法：注射用针头、针筒及玻璃器皿等，先洗涤洁净烘干后，再在180℃加热2小时或250℃加热30分钟以上处理破坏热原。

7、 蒸馏法：利用热原的不挥发性来制备注射用水，但热原又具有水溶性，所以蒸馏器要有隔沫装置，挡住雾滴的通过，避免热原进入蒸馏水中。

8、 反渗透法：用醋酸纤维素膜和聚酰胺膜制备注射用水可除去热原，与蒸馏法相比，具有节约热能和冷却水的优点。

9、 其他：采用两次以上湿热灭菌法或适当提高灭菌温度和时间可除去热原，具有节约热能和冷却水的优点。

（三）热原检查方法

1、家兔发热实验法（热原检查法）

由于家兔对热原的反应与人基本相似，目前家兔法仍为各国药典规定的检查热原的法定方法。《中国药典》2005年版规定的热原检查法系将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。检查结果的准确性和一致性取决于试验动物的状况、试验室条件和操作的规范性。家兔法检测内毒素的灵敏度为0.001μg/ml,试验结果接近人体真实情况，但操作繁琐费时，不能用于注射剂生产过程中的质量监控，且不适用于放射性药物、肿瘤抑制剂等细胞毒性药物制剂。 2、鲎试剂法(细菌内毒素检查法)

细菌内毒素检查法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法．细菌内毒素的量用内毒素单位（EU）表示。

细菌内毒素检查包括凝胶法和光度测定法两种方法，前者利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒素，后者包括浊度法和显色基质法，系分别利用鲎试剂与内毒素反应过程中的浊度变化及产生的凝固酶使特定底物释放出呈色团的多少来测定内毒素。

鲎试剂法检查内毒素的灵敏度为0.0001μg/ml,比家兔法灵敏10倍，操作简单易行，试验费用低，结果迅速可靠，适用于注射剂生产过程中的热原控制和家兔法不能检测的某些细胞毒性药物制剂，但其对革兰阴性菌以外的内毒素不灵敏，目前尚不能完全代替家兔法。 六、制备过程 [处方]

盐酸精氨酸 250g 注射用水 加至1000ml 需制成规格20ml:5ml共1000支，拟定具体的实施方案。 [拟定计划]

1、设备和容器的清洗：包括房间的清洗、配液缸的清洗、管道清洗、滤器清洗、安瓿处理。

2、物料领取：领取经验合格的注射用规格的盐酸精氨酸原料。 3、注射剂的流程：

配液→过滤 →灌封 →灭菌 →检漏→质检 →印包

[实施方案]

1、 各设备按常规方法清洗完毕待用。

2、 物料验收后领取，20ml规格安1100支，盐酸精氨酸原料6000g。检验报告得出盐酸精氨酸原料实际含量99%。 3、 制备流程 （1）称量 进行投料量计算：

实际灌注数=（20ml+0.6ml）*1000=20600ml

实际配液数=20600ml+(20600ml*5%)=21630ml(5%为实际灌装损耗数) 故盐酸精氨酸实际投料量为62.1g.

操作人员按生产指令和处方在10外级洁净区内准确称量盐酸精氨酸，并核对物料的检验报告单。量取时应两人量取，两人复核确保无误，量取时应两人量取，两人复核无误，量取后的物料置洁净容器内备用。将剩余原料封严保管好。 （2）配置：在配液灌中加入适量的水，搅拌下加入盐酸精氨酸，充分搅拌溶解后加入注射用水至处方中全量，密闭罐体，混匀。

化验室取样进行半成品检查（中间体检验）：快速分析，测定含量。入不合格项目应重新调整，调整后重新测定。

（3）过滤：将粗略用钛滤器组装好后，与配液缸连接。注射用水实验，冲洗管道。过滤用药，初滤液弃去1000ml之后，之后的滤液经管道送入注罐中。贮罐应标明品名、批号、数量、操作者，备用。

（4）洗瓶：将安瓿脱外包装后经传递窗进入洗瓶室，放入洗瓶机进洗瓶槽内，经循环水、压缩空气，注射用水冲洗后，进入安瓿灭菌干燥机内，设置温度为300度，灭菌后安经传送带进入灌封室。

（5）灌封：领取药液，核对品名、ml批号、规格、数量、检验报告单，确认装量，调整装量为20.6ml，空瓶调整火焰温度和熔封温度，达到要求后，接入药

液，合格后连续生产。每隔10分钟检查一次装量，随时观察熔封情况，挑出不合格品，有异常情况应随时停机处理。

灌封后的半成品放入不锈钢盘中，并放入传递小票，标明品名、批号、规格、顺序号、灌封时间、操作者。每批药液应在配置后4小时内灌封完毕。

（6）灭菌检漏：核对所需灭菌药品的品名,批号，规格，数量，无误后，将药品整齐摆放于灭菌检漏器内，115℃灭菌30min。具体操作如下： a)将蒸汽放入灭菌柜（锅）夹层内。预热10~20min b)将安瓿送入柜内，关闭柜门，严管锁住。

c)将蒸汽逐渐放入柜内，1~3min后，打开排气阀门，将柜内空气与蒸汽放出约30s，关闭排气阀门。

d)当柜内温度升到115℃、压力达到6.86x104Pa时便开始计算灭菌时间。并维持这个温度与压力30min。

e)当灭菌时间到达规定后，立即关闭进气阀门。

f)趁余热通入0.05%曙红液或0.05%美蓝液，检漏清洗。待柜内压力降至“0”时，开门取出药品，并标明灭菌状态，填好传递卡，放在规定位置。灌封后半成品在3h灭菌完毕。

（7）灯检：在灯检机下目视检查是否有肉眼可见混浊或异物，挑出封漏、泡头、钩、尖、炭化及内含色点、玻璃屑、纤维、黑点、白点等不合格品。并观察装量应基本一致。检后药品应在每盘填好品名、规格、批号、日期、数量个人编号和灭菌柜号。不合格品集中放置并注明品名、规格、批号、数量，移交专人处理并作好记录。

（8）检验：样品送质检部门进行性状、pH值、鉴别与含量测定、无菌试验、热源实验、装量差异等检查项目。

（9）印字、包装：操作者按生产指令领取外包装材料，并由两人以上核对包装物的品名、规格、数量、检验报告单。核对待包装品的品名、规格、批号、数量检验单，审核无误后，在瓶身印品名、批号、规格，在说明书套盒及大箱的规定处印上产品批号、有效期截止日期、生产日期。

（10）入库:包装后的成品登记品名、数量、批号，缴入仓库放指定地点，并标明状态，不同品种药品或同品种不同批号的药品不得混放。