宁夏鲜枸杞原汁对抗运动性疲劳的研究

中国康复医学杂志。２００８年，第２３卷，第７期　・基础研究・　宁夏鲜枸杞原汁对抗运动性疲劳的研究　武剑１，２马宝玲　胡居吾　摘要　目的：研究宁夏鲜枸杞原汁对小鼠的抗运动性疲劳的作用。方法：将宁夏鲜枸杞原汁分为８．３、１６．６、２５ｍｌ／（ｋｇ・　ｄ１三个剂量组给小鼠灌胃，对照组给等剂量生理盐水，共２１ｄ。末次喂养后，负重游泳小鼠游泳至死并记录小鼠入水游　泳至死亡时间，其他小鼠按不同测试指标运动方案使其疲劳，测定肝糖原、血乳酸（ＬＡＧ）、血尿素氮（ＢＵＮ）的含量。　结　果：２５ｍｌ／（ｋｇ・ｄ）剂量的灌服宁夏鲜枸杞原汁能明显延长小鼠负重游泳时间，提高小鼠运动后体内肝糖原的含量，降低　血尿素氮（ＢＵＮ）和血乳酸（ＬＡＧ）的含量：１６．６ｍＶ￣ｇ・ｄ１剂量的灌服宁夏鲜枸杞原汁只延长小鼠负重游泳时间、降低血乳　酸（ＬＡＧ）的含量．而对体内肝糖原含量、血尿素氮（ＢＵＮ）含量的影响差异无显著性意义；８．３ｍｌ／（ｋｇ・ｄ）剂量的灌服宁夏　鲜枸杞原汁对所测疲劳指标的影响差异均无显著性意义。结论：对小鼠进行适宜剂量的灌服鲜枸杞原汁具有良好的　抗运动性疲劳作用。　关键词枸杞；血乳酸；血尿素氮：肝糖原；抗疲劳　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１—１２４２（２００８）－０７—０６４３—０３　中图分类号：Ｒ２４６，Ｒ４９３　ｓｔｕ＠ｏｎ　ｔｈｅ　ａｎｔｉｆａｔｉｇｕｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｒａｗ　ｊｕｉｃｅ　ｆｒｏｍ　Ｌｙｃｉｕｍ　ｃｈｉｎｅｎｓｅ　Ｍｉｌｌ／ＷＵ　Ｊｉａｎ，ＭＡ　Ｂａｏｌｉｎｇ，ＨＵ　Ｊｕｗｕ，ｅｔ　ａｌｄｌＣｈｉｎｅｓｃ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｒｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ　Ｍｅ￣ｃｍｅ，２００８，２３（７）：６４２Ｉ－６４５　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ａｎｔｉ—ｆａｔｉｇｕｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｒａｗ　ｊｕｉｃｅ　ｆｒｏｍ　Ｌｙｃｉｕｍ　Ｃｈｉｎｅｎｓｅ　Ｍｉｌ１．Ｍｅｈｏｄ：ｔＴｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｏｆ　ｍｉｃｅ　ｇｉｖｅｎ　ｒａｗ　ｊｕｉｃｅ　ｆｒｏｍ　Ｌｙｃｉｕｍ　ｃｈｉｎｅｎｓｅ　Ｍｉｌｌ　ａｔ　ｄｏｓｅｓ　ｏｆ　８．３，１６．６，２５ｍｌ／（ｋｇ‘ｄ），ａｎｄ　ａ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐ　ｇｉｖｅｎ　ｓａｌｉｎｅ．Ａｌｌ　ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ　ｆｅｄ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｇａｓｔｒｉｃ　ｔｕｂｅ　ｆｏｒ　２１　ｄａｙｓ．Ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ｌａｓｔ　ｆｅｄ，ｍｉｃｅ　ｗｅｒｅ　ｆｏｒｃｅｄ　ｔｏ　ｓｗｉｍ　ｔｏ　ｉｎｄｕｃｅ　ｆａｔｉｕｅ．Ｅｘｈａｕｓｇｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｏｆ　ｅｘｅｒｃｉｓｅｓ，ｌｉｖｅｒ　ｇｌｙｃｏｇｅｎ，ｂｌｏｏｄ　ｌａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｂｌｏｏｄ　ｕｒｅａ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ（ＢＵＮ）ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：ｈｅＴ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　２５ｍ￣ｇ‘ｄ）ｉｎｐｕｔ　ｐｒｏｖｉｄｅｄ　ｏｂｖｉｏｕｓ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｎ　ｐｒｏｌｏｎｇｉｎｇ　ｔｈｅ　ｓｗｉｍｍｉｎｇ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｔｈｅ　ｌｉｖｅｒ　ｇｌｙｃｏｇｅｎ　ｏｆ　ｍｉｃｅ．Ｉｔ　ｃｏｕｌｄ　ａｌｓｏ　ｒｅｄｕｃｅ　ＢＵＮ　ａｎｄ　ＬＡＣ．Ｔｈｅ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　１６．６ｍｌ／（ｋｇ・ｄ）ｉｎｐｕｔ　ｃｏｕｌｄ　ｏｎｌｙ　ｐｒｏｌｏｎｇ　ｔｈｅ　ｓｗｉｍｍｉｎｇ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ　ｒｅｄｕｃｅ　ＬＡＣ　ａｎｄ　ｈａｄ　ｎｏ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ　ｍｅａｎｉｎｇ　ｔｏ　ＢＵＮ．Ｔｈｅ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　８．３ｍｌ／（ｋｇ・ｄ、　ｉｎｐｕｔ　ｈａｄ　ｎｏ　ｍｅａｎｉｎｇ　ｔｏ　ａｌｌ　ｔｈｅ　ｆａｔｉｕｅ　ｆｇａｃｔｏｒｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ｈｅＴ　ｐｒｏｐｅｒ　ｉｎｐｕｔ　ｄｏｓｅ　ｏｆ　ｒａｗ　ｊｕｉｃｅ　ｆｒｏｍ　Ｌｙｃｉｕｍ　ｃｈｉｎｅｎｓｅ　Ｍｉｌ　ｈａｓ　ｃｏｎｓｉｄｅｒａｂｌｅ　ａｎｔｉ－ｆａｔｉｕｅ　ｅｆｇｆｅｃｔ　ｏｎ　ｍｉｃｅ．　Ａｕｔｈｏｒ　Ｓ　ａｄｄｒｅｓｓ　Ｈａｎｄａｎ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｈｅｂｅｉ　Ｈａｎｄａｎ，０５６００１　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｌｙｃｉｕｍ　Ｃｈｉｎｅｎｓｅ　Ｍｉｌｌ；ｌａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ；ｂｌｏｏｄ　ｕｒｅａ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ；ｌｉｖｅｒ　ｇｌｙｃｏｇｅｎ；ａｎｔｉ－ｆａｔｉｕｅ　ｇ提高机体抵抗疲劳的能力，使运动潜能充分发　挥，争取最佳运动成绩是竞技体育永恒的课题。竞技　体育的这种极限化训练势必给机体带来最大限度的　疲劳，如何消除疲劳使机体快速恢复．有赖于对抗疲　劳物质的科学研究。枸杞是我国传统的名贵中药材，　具有多方面的药理作用和生物活性功能。宁夏枸杞　含胡萝卜素、维生素Ｂ１、Ｂ２和Ｃ，烟酸、钙、磷、铁　鲜枸杞原汁制备：鲜枸杞来源于宁夏，将２０ｋｇ　鲜枸杞一次性在通常条件下榨汁、过滤，收集滤液，　高温瞬时杀菌，冷却，即得枸杞原汁。将枸杞原汁置　于冰箱中冷冻备用。在实验期３周内用同一批枸杞　原汁喂养实验动物。本品主要功效成分粗多糖含量　为５５０ｍ＃１００ｍｌ。　主要试剂：尿素氮测定试剂盒（由北京北化精细　等。种子含脂肪油１７．２１％、总糖量２２％一５２％、蛋白　质１３％一２１％、粗脂肪８％一１４％；果实含甜菜碱、酸　化学品有限责任公司生产）；５％三氯醋酸（用蒸馏水　配）；葡萄糖标准液１００ｍｇ／ｄＬ；浓硫酸（ＡＲ）；蒽酮试　剂（含０．０５％的蒽酮，１％的硫脲。用７２％的ＨＲＳＯ　溶　浆红色素等，其有效成分为含氮甙。但未得纯品．其　果实水溶性部分含枸杞多糖，约６％一８％。目前，国内　对宁夏枸杞水煎液［１Ｊ、枸杞提取物ｌ２　、枸杞多糖　的　液配制）。４％ＣＵＳＯ　；１％ＮａＦ溶液等。　主要仪器：ＳＡＢＡ１８型全自动生化分析仪（意大　ｌ邯郸学院体育系，河北邯郸，０５６００１　２河北师范大学体育学院　抗疲劳作用均有研究。但对宁夏鲜枸杞原汁对抗运　动性疲劳作用尚未见报道。　１材料与方法　３南昌大学教育部食品科学重点实验室，中德联合研究院　４河北科技师范学院　１．１材料与设备　作者简介：武剑，男．在读硕士研究生　收稿Ｅｔ期：２ｏ０７—０９一ｌ９　维普资讯 http://www.cqvip.com ６４４　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＲｅｈａｂｉｌｉｔａｔｉｏｎ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｕ１．２００８，Ｖｏ１．２３，Ｎｏ．７　利１；水浴锅（上海宏兴机械仪器实业制造公司）；游　泳箱（５０ｃｍｘ５Ｏｃｍｘ４Ｏｃｍ）；电子天平（上海耀杰机电　试物后３０ｒａｉｎ，取小鼠肝脏测定肝糖原含量。肝糖原　测定采用南京建成生物工程公司生产的相应试剂盒　测定。室温：２２—２４℃。　１．５统计学分析　技术有限公司１；血色素吸管；ＵＶ一１２０—０２型分光光　度计（日本岛津）、ＬＤ５—２Ａ超速离心机（北京路科顺　科技发展有限公司）加样器；吸量管；试管、具塞试管　等。　１．２实验动物　各项数据均采用ＳＡＳ（６．１２版）软件在计算机上　进行方差分析，方差分析有差异再进行多重比较，所　得数据以平均数±标准差表示。　ＳＰＦ级昆明种雌性小鼠１６０只．３周龄．体质量　１８—２２ｇ，由湖北省预防医学科学院实验动物中心提　供『生产许可证号为ＳＣＸＫ（鄂）２００３—０００５，实验动物　使用许可证号为ＳＹＸＫ（鄂）２００３—００１４］。动物饲养　室温度为２２—２４℃。湿度为６５％一８０％。　１．３剂量分组　按人体推荐日摄人量０．８３ｍｌ／ｋｇ・ＢＷ扩大１０、　２０、３０倍设置低剂量、中剂量、高剂量３个剂量组，　即８－３，１６．６，２５ｍ￣ｋｇ・ＢＷ（原汁量）。同时设置空白对　照组（给予生理盐水）。各实验组均将原汁定量稀释　后按０．２０ｍｌ／１０ｇ・ＢＷ容量经口灌胃给予．高剂量组　按０．２５ｍｌ／１０ｇ・ＢＷ容量给予。　１．４实验方法　１．４．１负重游泳试验：采用健康小鼠４０只．随机分　成低剂量组、中剂量组、高剂量组、对照组。每组１０　只。连续灌胃２１ｄ．末次给小鼠尾根缚以自身体重　５％的重物。让其在５０ｃｍｘ５０ｃｍｘ４０ｃｍ、水深３０＋＿２ｃｍ　水槽中游泳。观察并记录小鼠入水游泳至力竭时间　（力竭标准是小鼠沉入水底１０ｓ不浮出水面．捞出后　在平面不能进行翻正反射）。室温２２—２４℃．水温：　３０℃。　１．４．２血乳酸（１ａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ，ＬＡＣ）含量的测定：采用健　康小鼠４０只，随机分成低剂量组、中剂量组、高剂量　组、对照组，每组１０只，连续灌胃２１ｄ。末次放人　３０℃的水中游泳１０　ｍｉｎ，游泳前、游泳后即刻分别　取血（内眦取血）测定血乳酸值（１ａｃｔｉｃ　ａｃｉｄ。【　，血乳　酸测定采用自配试剂测定方法。室温：２２—２４℃。　１．４．３血清尿素氮（ｂｌｏｏｄ　ｕｒｅａ　ｎｉｔｒｏｇｅｎ．ＢＵＮ）含量　的测定：采用健康小鼠４０只。随机分成低剂量组、中　剂量组、高剂量组、对照组。每组１０只．连续灌胃　２１ｄ后，末次放人３０℃的水中游泳９０ｍｉｎ。出水后休　息６０ｍｉｎ，眼球取血测定ＢＵＮ含量。尿素氮测定采　用意大利产ＳＡＢＡ１８型全自动生化分析仪和上海长　征生化试剂公司生产的相应试剂盒测定。室温２２—　２４℃。　１．４．４肝糖原含量（１ｉｖｅｒ　ｇｌｙｃｏｇｅｎ）的测定：采用健　康小鼠４０只，随机分成低剂量组、中剂量组、高剂量　组、对照组，每组１０只．连续灌胃２１ｄ后．末次给受　２结果　２．１鲜枸杞原汁对小鼠体重及负重游泳时间的影　响　灌胃给予小鼠不同剂量的鲜枸杞原汁２１ｄ后，　低、中、高三个剂量组小鼠体重与对照组比较差异均　无显著性意义（Ｐ＞０．０５）。　连续给予小鼠不同剂量的鲜枸杞原汁２１ｄ后，３　个剂量组均能延长小鼠负重游泳时间，其中低剂量　组与对照组比较差异无显著性意义。中、高剂量组与　对照组相比差异具有显著性意义（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）　（表１）。　表１鲜枸杞原汁对小鼠负重游泳至　力竭死亡时间的影响　与对照组比较：①Ｐ＜Ｏ．０５，②Ｐ＜Ｏ．Ｏ１　２．２鲜枸杞原汁对小鼠血乳酸值、血清尿素氮、肝　糖原含量的影响　见表２。各剂量组小鼠游泳后血乳酸值均较游　泳前升高。其中低剂量组与对照组比较差异无显著　性意义．中、高剂量组与对照组比较差异有显著性意　义（Ｐ＜０．０５。Ｐ＜０．０１），中剂量组与高剂量组比较差异　无显著性意义。　３个剂量组小鼠血清尿素氮值均较对照组减　少。其中低、中剂量组与对照组比较差异无显著性意　义。高剂量组与对照组比较差异有显著性意义（Ｐ＜　０．０５）。　３个剂量组小鼠肝糖原含量均高于对照组．其　中低、中剂量组与对照组比较差异无显著性意义　表２鲜枸杞原汁对小鼠血乳酸、血清尿素氮、　肝糖原含量的影响（　，ｍｍｏｌ／Ｌ　与对照组比较：①Ｐ＜Ｏ．０５，②Ｐ＜Ｏ．Ｏ１　维普资讯 http://www.cqvip.com

中国康复医学杂志，２００８年，第２３卷，第７期　６４５　（　０．０５），高剂量组与对照组比较差异有显著性意　义（Ｐ＜０．０５）。　３讨论　有研究表明，宁夏枸杞水煎液…、枸杞提取　物【　－引、枸杞口服液嘲可明显延长小鼠存活时间和持　续力竭游泳时问，有效提高小鼠的抗疲劳能力。实验　结果提示，中、高剂量组可明显延长小鼠负重游泳至　力竭时间，更好地增强小鼠抗疲劳能力。　糖是机体重要的供能物质，糖酵解是短时间高　强度运动主要的供能方式。糖酵解产物乳酸是一种　酸性代谢产物．其浓度升高时可使肌肉中Ｈ　浓度上　升，ｐＨ值下降，在ｐＨ值降低的情况下磷酸果糖激　酶的活性被抑制，从而使机体能量代谢水平降低，运　动能力下降，是疲劳产生的机制之一。本结果提示，　鲜枸杞原汁可降低血清乳酸含量，改善骨骼肌利用　氧的能力和心血管系统的供氧能力，使有氧代谢能　力增强，减少乳酸堆积，维持内环境酸碱平衡，具有　明显的抗疲劳作用。并且通过本实验不同剂量组结　果说明中、高剂量组对小鼠都有较好的抗疲劳作用　ＢＵＮ是蛋白质的代谢产物，是评价运动时体内　蛋白质分解代谢的常用指标，一般运动时间不超过　３０ｒａｉｎ，蛋白质较少参与供能，ＢＵＮ变化不明显。较　长时间运动后，当机体长时间不能通过糖、脂肪分解　代谢获得足够的能量时，蛋白质与氨基酸分解代谢　加强，ＢＵＮ才明显增加。机体ＢＵＮ含量随运动负荷　的增加而增加，机体对负荷的适应性越差，则产生的　ＢＵＮ越多。枸杞提取物可以提高运动前、后血液乳　酸脱氢酶总活力ｌ２－５１；降低小鼠剧烈运动后血尿素氮　增加量，加快运动后血尿素氮的清除速率。本实验结　果显示，连续给予小鼠不同剂量的鲜枸杞原汁２１ｄ　后，在大强度耐力训练中，灌服鲜枸杞原汁的高剂量　组ＢＵＮ含量明显低于对照组，说明适宜剂量的鲜枸　杞原汁可以降低小鼠体内蛋白质供能比例，保持肌　力，延缓运动性疲劳的发生。本品粗多糖含量为　５５０ｍｇ／ｌＯＯｍｌ，结果与枸杞多糖研究结果相似，说明　枸杞多糖可能是宁夏枸杞原汁的主要抗疲劳功效成　份。　糖作为重要能源物质在机体内主要以肌糖原和　肝糖原的形式储存。长时间运动的体力消耗总是与　肌糖原减少同时发生；肌糖原消耗的同时，为维持血　糖水平，肝糖原就会相应减少．因此糖原的储备量可　直接影响机体的运动能力，提高糖原储备量有助于　提高运动能力，延缓运动性疲劳的产生。枸杞多糖　可以显著地增加小鼠肝糖原储备量［５１，本实验结果　显示，连续给予小鼠不同剂量的鲜枸杞原汁２１ｄ后，　灌服鲜枸杞原汁的高剂量组肝糖原值明显高于对照　组，说明灌服适宜剂量的鲜枸杞原汁可以提高糖原　储备量，延缓运动性疲劳的产生。　参考文献　［１］王宁元，刘斌钰．枸杞子对小鼠耐寒冷耐缺氧耐疲劳的影响ｆＪ］．齐　齐哈尔医学院学报，２００２，２３（１）：１—２．　［２］丁得，张得钧．枸杞对小鼠急性运动后自由基代谢的影响ｆＪ］．青海　师范大学学报自科版，２００１，（１）：５５—５８．　【３］徐承水．ＮＳｇｑ￣ｘＣｄ，鼠耐力影响的实验研究［Ｊ１＿浙江中医学院学　报。２０００．２４（４）：４８－－４９．　ｆ４１中华人民共和国卫生部．保健食品检验与评价技术规范ｆＭ］．　２ｏｏ３．　［５］　罗琼，张声华．枸杞多糖的分离纯化及其抗疲劳作用ｆＪ］．卫生研究，　２０００，２９（２）：１　ｌ５—１　１　７．　［６］郑莉莉．枸杞口服液抗疲劳与耐缺氧作用的实验研究［Ｊ１＿甘肃中　医学院学报，１９９９，ｌ６（２）：ｌ８—１９．　［７］马壮，任永华，郭斌，等．海参提取液对抗运动性疲劳的研究［Ｊ１＿北　京体育大学学报．２００６．２９（９）：２７－－２８．　［８］武露凌，刘钢．关于运动性疲劳动物模型建立的综述［Ｊ１＿体育与科　学．２００７．２８（３）：７３－－７６．　［９］金有预．药理学［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２００１．１４５２１５５．　［１Ｏ］章小菊，韩慧婉，姚鸿恩．疲劳性运动对血浆游离氨基酸和中枢　神经递质影响的研究进展『Ｊ］．中国运动医学杂志，１９９９，１８（２）：　１５１—１５２．　［１１］杨则宜．运动营养生物化学研究进展ｆＪ］．中国运动医学杂志，　２００４，２３（２）：１５８—１６４．